条件性点突变小(大)鼠
技术原理简介
条件性点突变主要是通过Loxp2722-Loxp/Cre介导的DNA片段反转技术,利用CRISPR技术剪切目标基因的DNA,通过DNA的同源重组修复,在目标基因特定exon后的intron上,敲入反向的带有点突变exon。正常情况下,目标基因拼接野生型的exon, 表达野生型蛋白;当与Cre交配后,在Cre表达的细胞和组织中,反向带有点突变exon被反转,目标基因拼接带有点突变的exon,并表达点突变蛋白。
基石生命自主研发的第三代基因敲除敲入系统,该系统采用受精卵注射的方式将一对Loxp2722-Loxp序列高效地插入到基因组上,较传统的ES系统的方法提高了近2000倍。本公司最快3个月可以得到Founder!郑重承诺,失败全额退款!
TALEN/CRISPR构建条件性点突变小(大)鼠技术流程图
服务流程及周期
步骤 |
说明 |
周期 |
Cas9靶点的设计与活性检测 |
选活性高的Cas9 靶点做后续小鼠基因点突变工作。 |
4-8周 |
Donor DNA的设计与准备 |
构建并准备donor。 |
4-8周 |
显微注射受精卵获得founder小鼠 |
检测founder基因型,确认发生基因点突变。 |
1.5-5个月 |
获得到F1代杂合子 |
founder小鼠与野生型小鼠交配,获得稳定遗传的F1代杂合子,交货给客户。 |
3-4个月 |
流程对比
我们的优势