转基因小（大）鼠

技术原理简介

转基因小鼠是指将一段外源基因随机整合到小鼠基因组中，获得过表达该目的基因的小鼠模型。基石生命采用PiggyBac转座子系统实现表达目的基因转基因鼠的构建，PiggyBac转座子是一种通过“剪切&粘贴”式机制在载体和基因组间进行高效移动遗传元件的系统。在转座时，转座酶可以特异性的识别位于转座子载体两端的反向末端重复序列(ITR)，并有效的将ITR将其之间的序列从转座载体上原有的位置剪切下来，然后高效的整合进染色体上的TTAA位点。

基石生命采用的PiggyBac介导法进行转基因鼠的构建，采用受精卵注射的方式将构建有目的片段的转座子载体与PiggyBac转座酶的mRNA一起注射到受精卵中，使目的片段高效的整合到基因组上，PiggyBac系统较普通方法具有更高的基因组整合效率，携带的目的基因不受大小限制，并且具有更高的表达效率。本公司郑重承诺，失败全额退款！

 

PiggyBac构建转基因小(大)鼠技术流程图

服务流程及周期

 

步骤	内容	周期
转基因元件获得	客户提供或全基因合成	根据实际情况而定
转基因质粒构建	将转基因元件构建到转基因质粒pPiggy载体上	2-4周
构建转基因小鼠Founder	显微注射受精卵，胚胎移植到代孕母鼠子宫，3周后出生，2周龄基因型鉴定。数量：至少2只	3-5个月

 

转基因小(大)鼠类型

过表达转基因小(大)鼠

构建上述常规的带有启动子和目的基因的表达载体，利用原核显微注射的方法将表达载体注射到小鼠受精卵中。通过构建广泛性/组织特异性/诱导性等不同的启动子，实现转基因在小鼠组织广泛性/特异性等的表达，达到对目的基因功能的研究目的。

RNAi转基因小(大)鼠

通常采用U6/H1等III型启动子驱动shRNA表达，设计靶序列构建shRNA载体，利用原核显微注射的方法将shRNA载体注射到受精卵中。在基因表达的过程中，通过shRNAi的干扰作用，达到对目的基因表达的抑制，实现基因功能的研究。

随机插入式条件性过表达小(大)鼠

将构建的广泛表达启动子-LoxP-Stop-LoxP-转基因载体通过显微注射制备组织特异性转基因小(大)鼠模型，转基因在正常情况下并不表达，只有与相应的组织特异性表达Cre/CreERT2小鼠杂交后，因Stop终止序列在特定的组织中被去除，从而达到转基因在诱导性/特定组织中特异性表达的目的。

我们的优势