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诱导表达细胞系构建
Tet-Off/ Tet-On系统是一种利用原核调控元件在真核细胞中定量并特异的控制外源基因表达体系,它是用大肠杆菌T10转座子中四环素操纵子原理来实施调控的。Tet-Off/ Tet-On系统是比较成熟的真核生物外源基因诱导表达系统之一,具有高效,无毒,开/关较严密等特点,已被成功的应用于细胞和转基因小鼠基因诱导表达的研究。
原理
1. rTs为抑制剂(红色元件),M2为激活剂(绿色元件)
2. 在不加Dox时,rTs工作,抑制目的载体的转录,从而抑制目的蛋白表达
3. 在加Dox时,M2工作,激活目的载体的转录,从而激活目的蛋白表达
诱导表达细胞系构建流程
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